미생물학에서 미지의 박테리아를 식별하는 방법

작가: Lewis Jackson
창조 날짜: 8 할 수있다 2021
업데이트 날짜: 15 할 수있다 2024
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그람 염색에 대한 세균 도말을 준비하는 방법
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더 높은 수준의 미생물학을 다닐 때 교사는 일련의 테스트를 통해 알려지지 않은 박테리아를 확인해야하는 프로젝트를 완료하도록 요구할 수 있습니다. 이 박테리아를 적절하게 확인하려면 모든 적절한 실험실 장비를 갖추고 다양한 실험실 절차를 알아야합니다. 박테리아의 흐름도 및 실험실 검사를하는 것이 유리하므로 박테리아를 식별 할 수 있습니다.


지침

배양 플레이트를 사용하면 세균을 분리하여 특성을 쉽게 확인할 수 있습니다. (Hemera Technologies / Photos.com / Getty Images)
  1. 실험을 시작하기 전에 모든 테스트를 준비하십시오. 이것은 한천 플레이트와 튜브를 준비하는 것뿐만 아니라 Kovac의 시약과 같은 필요한 지시약을 준비하는 것을 포함합니다. 모든 튜브와 플레이트를 적절하게 분류하여 섞이지 않도록하십시오. 그러면 잘못된 결과가 발생할 수 있습니다.

  2. 박테리아를 뿌리다. 이것은 그램 포지티브 (보라색), 그램 네거티브 (레드 또는 핑크), 코코넛 (원형), 스피로 체 (나선형) 또는 막대와 같은 세균의 모양과 색을 결정합니다. 당신의 박테리아를 뿌리기 위해서는 깨끗한 칼날, 물, 결정화 된 보라색, 요오드, 표백제, 사 프라 닌, 흡수성 종이, 가벼운 현미경 및 종이 타월이 필요합니다. 루프를 날린 후 블레이드 위에 물방울을 놓으십시오. 루프를 다시 밀고 물방울에 미지의 박테리아를 조금 넣으십시오. 블레이드를 불꽃에 몇 번 통과시켜 건조시키고 박테리아를 블레이드에 완전히 부착시킵니다. 결정화 된 보라색으로 덮고 잠시 방치 한 다음 부드럽게 씻으십시오. 그런 다음 날을 요오드로 덮으십시오. 30 초 동안 그대로 둔 다음 씻으십시오. 여분의 물을 제거하기 위해 칼날 위에 흡수성 종이 조각을 놓습니다. 그런 다음 블리치를 블레이드 위에 붓습니다. 5 초 후 씻어 표백제를 제거합니다. 마지막으로 safranin으로 블레이드를 덮습니다. 40 초 후에 잎을 닦고 종이 타월로 가볍게 말립니다. 슬라이드에 박테리아의 사이트에 기름 방울을 놓고 현미경을 봅니다. 보이는 박테리아의 모양과 색에 주목하십시오.


  3. 당신의 박테리아에있는 oxidase를 시험하십시오. 이를 위해서는 종이 필터, 산화 효소 시약, 대장균, 슈도모나스 및 미지의 박테리아가 필요합니다. 이 시험에서 E. coli와 Pseudomonas가 대조군이다. 귀하의 박테리아는이 검사를 위해 24 시간 미만이어야합니다. flam 핸들과 종이 필터의 조각에 각 박테리아의 소량을 놓으십시오. 점 적기를 사용하여 각 박테리아에 시약 산화 효소를 한 방울 떨어 뜨립니다. 10 초 후에 각 세균의 색을 기록하십시오. E. coli는 양성 결과를 주며 Pseudomonas는 음성 결과를 줄 것입니다. 사이토 크롬 옥시 다제 효소에 양성인 박테리아는 자주색이되고 박테리아는 색을 변화시키지 않습니다.

  4. 황화수소 (SIM) 테스트. 손잡이를 톡톡 치고 판에서 박테리아를 잡으십시오. SIM 튜브에 박테리아를 접종하고 덮개를 덮으십시오. 37 ℃에서 18 ~ 24 시간 동안이 관을 오븐에 남겨 둡니다. 박테리아가 이동할 수 있는지 확인하십시오 (편모 있음). 박테리아를 접종 한 곳에서 멀리 떨어진 곳에서 성장과 흐림이 있다면, 그것은 이동성입니다. 다음으로 Kovac 시약 2 방울을 튜브에 넣으십시오. 붉은 색 또는 분홍색으로 변색되면 박테리아는이 검사에서 양성이며 트립토판을 함유하고있어 인돌 생산자가됩니다. 튜브가 검게되면 박테리아가 황화수소를 생성합니다.

  5. Simmon 구연산염 검사를 수행하십시오. Simmon의 한천으로 2 개의 시험관에 박테리아를 접종하십시오. 37 ℃에서 18 ~ 24 시간 오븐에 보관하십시오. 한천은 초기에 초록색이지만 박테리아가 시트르산을 탄소원으로 사용하면 색상이 녹색에서 파란색으로 바뀝니다. 파란색은 긍정적 인 결과입니다. 튜브가 녹색으로 남아 있으면, 박테리아는 단일 탄소 공급원으로서 시트르산의 사용에 대해 음성입니다.

  6. 메틸 레드 테스트 (MRVP)를 수행하십시오. 이 검사에는 펩톤, 완충액, 덱스 트로 오스 (또는 포도당) 용액이 담긴 2 개의 튜브가 필요합니다. 미지의 박테리아를 각 튜브에 접종하고 37 ℃에서 18 ~ 24 시간 동안 스토브로 돌아갑니다. 준비가되면 메틸 레드 3 방울을 튜브에 넣으십시오. 이것은 당신의 MR 튜브가 될 것입니다. 튜브가 노란색에서 빨간색으로 바뀌면 그 박테리아는 양성이며 발효 중에는 혼합 된 산 경로를 사용합니다 (젖산, 아세트산 및 개미산 생성). 두 번째 튜브에 VP 시약 3 방울을 넣으십시오. 튜브가 빨갛게되면 박테리아는 발효 생성물 인 디 아세틸 (diacetyl) 형성에 양성 반응을 보입니다. 튜브가 갈색으로 변하면 세균이 음성입니다.


  7. 순서도에서 긍정적이고 부정적인 결과를 지적하여 박테리아를 찾으십시오.

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