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• 지침
• 열 복구
• 어떻게
• 공지 사항
• 필요한 것

고성능 액체 크로마토 그래피 (HPLC)는 시료가 컬럼을 통과 할 때 화학 성분으로 분리되는 실험실 분석의 일반적인 방법입니다. 이 컬럼은 일반적으로 실리카겔 인 다공성 물질로 채워져 있습니다. C8과 같은 표준 역상 컬럼은 때때로 막히거나 오염 될 수 있습니다. 이 열은 매우 간단한 기술을 사용하여 검색 할 수 있습니다.

지침

올바른 용매로 ​​더러운 컬럼을 회수 할 수 있습니다. (Jupiterimages / liquidlibrary / Getty Images)

열 복구

1. 컬럼을 풀고 그 위치를 반대로하여 이동상이 정상적으로 컬럼의 출력물을 통해 들어갈 수있게하십시오. 칼럼의 다른 쪽 끝 (원래의 입구)에 콘센트를 연결하고 방전되도록 배수 시키십시오.

2. 극성이 감소하는 순서로 일련의 용매를 펌핑하십시오. 권장되는 기본 시리즈는 메탄올로 시작한 다음 아세토 니트릴로 전환 한 다음 아세토 니트릴 / 이소프로판올 (75:25), 이소프로판올, 메틸렌 클로라이드 및 헥산으로 전환하는 것입니다. 칼럼에 있던 이동상이 흡수성 이었으면 메탄올에 물을 넣고 통과시키는 것이 좋습니다. 분당 1 ~ 2 밀리리터의 유량으로 충분하며, 각 용매의 약 10 부 칼럼을 펌핑해야합니다. 부피 열은 열의 내부 공간이며 (0.7 x pi x (DI / 2) ^ 2 x L)로 계산됩니다. 여기서 DI는 열의 내부 직경이고 L은 길이입니다.

3. 원래의 이동상과 함께 사용하기 위해 칼럼을 통해 10 배 용량의 이소프로판올을 펌핑하십시오. 원래의 이동상이 쿠션을 받았다면 원래의 이동상으로 되돌아 가기 전에 이소프로판올 후 컬럼을 통해 물을 펌핑하십시오.

4. 컬럼을 풀고 역전시킨 다음 다시 결합하여 원래 위치에 놓습니다 (이동상이 컬럼의 오른쪽으로 들어가도록). 스피커 출력을 감지기에 다시 연결하십시오.

어떻게

• 이 공정으로 칼럼을 완전히 세척하지 않으면 디메틸 술폭 시드 (DMSO)와 디메틸 포름 아미드 (DMF)의 50:50 혼합물을 사용할 수 있습니다. 단백질 및 금속 이온의 잔류 물은 이온 스페어 링 시약 또는 에틸렌 디아민 테트라 아세트산 (EDTA) 용액과 같은 다른 유형의 용매를 필요로 할 수 있습니다.

공지 사항

• 일부 기기의 경우 척추에는 입구로 거친 금속 체가 있습니다. 이 경우, 컬럼을 되돌리면 고정상이 컬럼을 떠날 수 있으므로 권장하지 않습니다. 잘 모르겠 으면 대리점에 문의하십시오.
• 이 과정에서 사용되는 용매는 섭취되거나 흡입 될 때 잠재적으로 유독합니다. 취급시 일반적인 실험주의 사항을 따르십시오.

필요한 것

• HPLC 장치
• 물
• 메탄올
• 아세토 니트릴
• 이소프로판올
• 염화 메틸렌
• 헥산