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고성능 액체 크로마토 그래피 (HPLC)는 혼합물에서 물질을 분리하는 데 사용되는 도구입니다. 특정 화학 물질의 분리 및 식별은 주로 시스템의 크로마토 그래피 컬럼에서 발생합니다. CLAE에는 여러 컬럼 유형을 사용할 수 있으며 각각 특정 유형의 분석에 사용됩니다. C18 컬럼은 일반적으로 사용되는 가장 강력한 비극성입니다. 장기간 연속 사용하면이를 통한 용매의 유속이 감소하고 분석 시간이 증가합니다. 분석 시간이 단축되는 또 다른 원인은 컬럼 재료에 소량의 화학 물질이 남아있는 시료가있어 분리 능력이 저하되기 때문입니다. 표면의 복원은 재료를 일련의 특정 용매로 처리하여 나머지 샘플에서 청소하고지지 재료를 활성화함으로써 수행 할 수 있습니다.
1 단계
흐름 방향에서 컬럼 C18을 제거하고 반대 방향으로 놓습니다. 용매를 다시 통과 시키면 시간이 지남에 따라 발생하는 축적 효과가 완화됩니다. 컬럼 끝에 너무 많은 재료가 축적되지 않도록주의해야합니다. 일부 공장에서는 상단에 더 큰 메시를 사용하여 흐름 방향이 변경 될 때 메시가 아래 위치에 있습니다. 이 복원 방법을 흐름 반전이라고합니다. 축적 물이 시스템 검출기로 흘러 들어가 방해를 유발하는 것을 방지하려면 검출기가 연결되지 않은 상태에서 작동하도록하고 컬럼에서 폐기로 흐름을 유도하십시오.
2 단계
용매 통과 튜브를 일련의 용매에 넣고 반대 방향으로 컬럼에 남아있는 화합물을 용리합니다. 이러한 용매는 친수성 특성이 다양합니다. 그것들을 변화시킴으로써, 당신은 똑같이 다양한 친수성 성질의 화합물을 용출 할 것입니다. 물 (완충제를 사용하는 경우), 메탄올, 이소프로판올, 디클로로 메탄, 헥산, 디클로로 메탄 및 이소프로판올의 각 용매 50ml를 연속해서 사용합니다.
3 단계
컬럼을 올바른 방향으로 교체하고 용매를 통과 시키십시오. 계속하기 전에 최소 75ml를 사용하여 세척하십시오. 새 것이었을 때 사용한 패턴으로 테스트하고 결과를 확인하십시오. 최대 유지 지점과 총 분석 시간에 도달 할 때주의하십시오. 이러한 속성이 아직 새 것이었을 때 초기 테스트와 일치하는 정도는 열이 복원 된 정도를 나타냅니다. 결과가 만족스럽지 않으면 열을 새 것으로 교체하고 이전 열을 버리십시오.